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組織培養中活性炭的應用方法
日期:2008-07-23     來源:中國組培網     作者:   我要評論()



  活性炭為木炭粉碎經加工形成的粉沫結構,它結構疏松,孔隙大,吸水力強,有很強的吸附作用,它的顆粒大小決定著吸附能力、粒度越小,吸附能力越大。溫度低吸附力強,溫度高吸附力減弱,甚至解吸附。通常使用濃度為0.5-l0g/L。它可以吸附非極性物質和色素等大分子物質,包括瓊脂中所含的雜質,培養物分泌的酚、醌類物質以及蔗糖在高壓消毒時產生的5-羥甲基糖醛及激素等。

  活性炭的應用:

    (1)莖尖初代培養,加入適量活性炭,可以吸附外植體產生的致死性褐化物,其效力優于Vc和半胱氨酸;在新梢增殖階段,活性炭可明顯促進新梢的形成和伸長,但其作用有一個閾值,一般為0.1%-0.2%,不能超過0.2%。

  (2)活性炭在生根時有明顯的促進作用,其機理一般認為與活性炭減弱光照有關,可能是由于根頂端產生促進根生長的IAA,但IAA易受可見光的光氧化而破壞,因此活性炭的主要作用就在于通過減弱光照保護了IAA,從而間接促進了根的生長,由于根的生長加快,吸收能力增強,反過來又促進莖、葉的生長。

  (3)此外,在培養基中加入0.3%活性炭,還可降低玻璃苗的產生頻率,對防止產生玻璃苗有良好作用。

  (4)活性炭在胚胎培養中也有一定作用,如在葡萄胚珠培養時向培養基加入0.1%的活性炭,可減少組織變褐和培養基變色,產生較少的愈傷組織。

  但是,活性炭具有副作用,研究表示,每毫克的活性炭能吸附l00ng左右的生長調節物質,這說明只需要極少量的活性炭就可以完全吸附培養基中的調節物質。大量的活性炭加入會削弱瓊脂的凝固能力,因此要多加一些瓊脂。很細的活性炭也易沉淀,通常在瓊脂凝固之前,要輕輕搖動培養瓶。總之,那種隨意抓一撮活性炭放人培養基,會帶來不良的后果。因此,在使用時要有其量的意識,使活性炭發揮其積極作用。

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