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觀賞植物組織培養(yǎng)中玻璃化問題的解決方案
日期:2008-07-23     來源:中國組培網(wǎng)     作者:   我要評論()



  20世紀(jì)30年代發(fā)展起來的植物組培技術(shù)經(jīng)過幾十年的探索,已經(jīng)在科研和生產(chǎn)上得到了廣泛應(yīng)用,并已經(jīng)成為觀賞植物快繁的重要途徑。但是,試管苗玻璃化現(xiàn)象嚴(yán)重降低了植物組培的效率,造成人力、物力、財(cái)力的極大浪費(fèi),成為當(dāng)今組培工作尤其是工廠化生產(chǎn)和試管材料保存的一大障礙。自1981年Debergh首先提出了試管植物“玻璃化作用(vitrification)”的概念以來,關(guān)于植物組織培養(yǎng)中玻璃化的原因和防止措施的研究報(bào)道很多,并積累了一定的數(shù)據(jù)與經(jīng)驗(yàn)。

  玻璃苗是在試管內(nèi)控制條件下培養(yǎng)植物的產(chǎn)物,是人工提供的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件不完全符合培養(yǎng)物固有需要的結(jié)果,培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件不適宜、不平衡是試管苗玻璃化發(fā)生的直接原因。植物試管苗玻璃化是組培過程中的三大難題之一,試管苗玻璃化問題的解決必將有助于提高整個(gè)植物組織培養(yǎng)的科學(xué)水平和經(jīng)濟(jì)效益,因此,在實(shí)際工作中有必要采取措施使觀賞植物試管苗的玻璃化現(xiàn)象降低到最低限度,直至消除玻璃化現(xiàn)象。隨著對玻璃化研究的深入,在控制玻璃苗發(fā)生時(shí),大多研究者均采用如下措施:選不易玻璃化的品種及部位做外植體材料。不同植物種類適宜的外植體部位可能不同,周菊華等認(rèn)為瑞香中部莖段發(fā)生玻璃化的幾率最大,而吳若箐等的結(jié)果表明香石竹的基部莖段發(fā)生玻璃化的可能性最大,這可能與不同植物的生理特性有關(guān)。

  利用固體培養(yǎng)基,增加瓊脂濃度,選擇適當(dāng)?shù)奶荚?提高培養(yǎng)基中蔗糖含量,從根本上降低培養(yǎng)基中的滲透勢,造成細(xì)胞吸水阻遏,減少培養(yǎng)基中植物材料可獲得的水分,因而可明顯降低觀賞植物試管苗玻璃化現(xiàn)象。采用通氣性好的封口材料如紗布、脫脂棉等代替聚乙烯塑料膜作為封口材料,可降有效低培養(yǎng)容器內(nèi)部環(huán)境的相對濕度,減輕有害氣體的積累,使植物光合作用順暢。培養(yǎng)基中BA是導(dǎo)致試管苗玻璃化的一個(gè)重要原因,選擇搭配合適的激素,適當(dāng)降低培養(yǎng)基中BA的濃度均可減輕玻璃苗的出現(xiàn)。通過培養(yǎng)條件(溫度和光照)減少玻璃苗的發(fā)生。控制溫度,避免過高的培養(yǎng)溫度,進(jìn)行變溫處理,適當(dāng)?shù)蜏靥幚砜上AЩ岣吖庹諒?qiáng)度,適當(dāng)延長光照時(shí)間,充分利用自然光照也可以減低玻璃苗的發(fā)生頻率。

  另外,在培養(yǎng)基中減少或除去NH4NO3,附加活性炭、青霉素、聚乙烯醇(PVA)、Ca、赤霉素(GA)及多效唑(PP333)等,減少繼代培養(yǎng)的次數(shù)等措施均可降低觀賞植物組培過程中玻璃苗的發(fā)生。

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